产品信息

中文名称：谷草转氨酶（GOT/AST）活性检测试剂盒说明书

储存条件：按照标签要求储存

有效期：6个月

检测意义：谷草转氨酶又叫天门冬氨酸氨基转移酶（ 2.6.1.1），广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，催化可逆转氨基反应，是氨基酸代谢的重要酶。此外，GOT在心肌细胞中含量最高，临床上一般常作为心肌梗塞和心肌炎的辅助检查。肝脏损害时其血清浓度也可升高。

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检测原理

GOT催化α-酮戊二酸和天门冬氨酸发生转氨基反应，生成谷氨酸和草酰乙酸，草酰乙酸进一步自行脱羧生成丙酮酸；丙酮酸可与2,4-二硝基苯肼反应生成2,4-二硝基苯腙，在碱性条件下显棕红色；测定505nm吸光度的变化，即可计算GOT酶活性。

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计算方法

1. 标准曲线的绘制：
以各标准溶液浓度为x轴，以∆A标准为y轴做标准曲线，得到方程y=kx+b。将ΔA 测定带入方程求x值（μmol/mL）。
2. GOT活性计算：
（1）按样本质量计算： 单位定义：每小时每g样本催化产生1μmol丙酮酸的量为一个GOT活性单位。
GOT活性（U/g 质量）=x×（V样本+V试剂一）÷（W×V样本÷V样总）÷T×F
（2）按样本蛋白浓度计算： 单位定义：每小时每mg组织蛋白催化产生1μmol丙酮酸的量为一个GOT活性单位。
GOT活性（U/mg prot）=x×（V样本+V试剂一）÷（Cpr×V样本）÷T×F
（3）按血清（浆）体积计算： 单位定义：每小时每mL血清样本催化产生1μmol丙酮酸的量为一个GOT活性单位。
GOT活性（U/mL）=x×（V样本+V试剂一）÷V样本÷T×F
（4）按细菌或细胞数量计算： 单位定义：每小时每106细菌或细胞催化产生1μmol丙酮酸的量为一个GOT活性单位。
GOT活性（U/106 cell）=x×（V样本+V试剂一）÷（N×V样本÷V样总）÷T×F
V样本：吸取样本体积，0.01mL；
V试剂一：吸取试剂一体积，0.04mL；
V样总：吸取提取液体积，1mL；
W：样本质量，g；
Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；
T：反应时间，0.5h；
N：细胞或细菌总数，以百万计；
F：样本稀释倍数。

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注意事项

1. 样本测试前请选取2个预期差异最大的样本，稀释成不同浓度进行预试，以选取
最佳取样浓度；
2. 若对照孔OD值减去测定孔OD值高于0.4时，可将样本用提取液进行稀释，计算时
乘以相应的稀释倍数即可；若测定孔OD值减去对照孔OD值低于 0.01 时，可以增加样本取样量或者取样浓度。
3. 丙酮酸的标准曲线不同操作条件下，可能存在差异。可以自行按照附录I进行相关检测。

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