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中文名称:植物甲醛脱氢酶(FALDH)活性检测试剂盒说明书
储存条件:按照标签要求储存
有效期:6个月
检测意义:FALDH的测定在植物甲醛代谢、环境适应性、生物技术、生理病理研究及生态毒理学等领域具有重要应用价值,有助于深入理解植物对甲醛的响应机制,并为环境修复和生物技术开发提供支持。
甲醛脱氢酶(Formaldehyde Dehydrogenase, FALDH)催化甲醛氧化生成甲酸并伴随NAD⁺还原为NADH的反应。实验通过检测NADH在340 nm处的吸光度变化来定量酶活性。
1. 组织样本植物甲醛脱氢酶(FALDH)计算
(1) 按样本鲜重计算:
单位定义: 每克组织每分钟生成1nmol NADH为一个酶活力单位。
FALDH(U/min/g 鲜重)=[△A×V 反总÷(ε×d)×109]÷(V 样÷V 样总×W)÷T=△A×0.268×103÷W
(2) 按样本蛋白浓度计算:
单位定义:每毫克蛋白每分钟生成1nmol NADH为一个酶活力单位。
FALDH(U/min/mg prot)=[△A×V 反总÷(ε×d)×109]÷(V 样×Cpr)÷T=△A×0.268×103÷Cpr
V反总:反应体系总体积,0.22×10-3 L;
ε:NADH,6.22×103L/mol/cm;
d:比色皿光径,0.6cmcm;
V样:加入样本体积,0.02mL;
V样总:加入提取液体积,1mL;
T:反应时间,5min;
Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;
109:单位换算系数,1mol=109nmol;
W:样本质量,g;
五、 注意事项:
1. 实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测;