产品信息

中文名称：组织与血液活性氧（ROS）检测试剂盒

英文名称：Organization and Blood Reactive Oxygen Species Assay Kit

储存条件：按照标签要求储存

有效期：6个月

检测意义：检测细胞内活性氧(ROS)水平对于理解细胞信号转导和研究疾病潜在作用机制具有重要意义。

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检测原理

荧光探针DCFH-DA本身没有荧光，可以自由穿过细胞膜，进入细胞内后，可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH。而DCFH 不能通透细胞膜，从而使探针很容易被装载到细胞内。细胞内的活性氧可以氧化无荧光的DCFH生成有荧光的DCF。检测DCF 的荧光就可以知道细胞内活性氧的水平。

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注意事项

 1、探针装载后，一定要洗净残余的未进入细胞内的探针，否则会导致背景较高。

2、探针装载完毕并洗净残余探针后，可以进行激发波长的扫描和发射波长的扫描，以确认探针的装载情况是否良好。

3、尽量缩短探针装载后到测定所用的时间(刺激时间除外)， 以减少各种可能的误差。

4、阳性对照可以按照1:1000的比例使用。例如装载好探针的细胞共1毫升，可以加入1微升的阳性对照刺激。通常刺激后20-30 分钟内可以观察到非常显著的活性氧水平升高。对于不同的细胞，活性氧阳性对照的效果可能有较大的差别。如果在刺激 后30分钟内观察不到活性氧的升高，可以适当提高活性氧阳性对照的浓度。如果活性氧升高得过快，可以适当降低活性氧 阳性对照的浓度。

5、对于某些细胞，如果发现没有刺激的阴性对照细胞荧光也比较强，可以按照1:2000- 1:5000稀释DCFH-DA，使装载探针时DCFH-DA的浓度为2-5微摩尔/升。

6、探针装载的时间也可以根据情况在15-60分钟内适当进行调整。

7、活性氧阳性对照(Rosup)仅仅用于作为阳性对照的样品， 并不是在每个样品中都需加入活性氧阳性对照。

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